大家好，今天給大家分享一篇來(lái)自美國(guó)加州大學(xué)戴維斯分校在《Journal of veterinary diagnostic investigation》發(fā)表了題為“Rabbit hemorrhagic disease virus 2, 2010–2023: a review of global detections and affected species”的文章。

兔出血癥病毒 2 型（Rabbit hemorrhagic disease virus 2，RHDV2/GI.2）作為杯狀病毒科兔病毒屬的重要成員，自 2010 年在法國(guó)首次被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，已迅速蔓延至全球各大洲，成為威脅家兔與野生兔科動(dòng)物的重要傳染病病原。該病毒引發(fā)的兔出血癥（RHD）以肝臟壞死和彌散性血管內(nèi)凝血為典型特征，具有高度傳染性，不僅對(duì)養(yǎng)兔業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，還對(duì)全球兔科動(dòng)物多樣性構(gòu)成嚴(yán)重威脅。本文基于 2024 年發(fā)表于《Journal of Veterinary Diagnostic Investigation》的最新綜述，系統(tǒng)梳理 RHDV2 的全球流行現(xiàn)狀、宿主范圍、致病機(jī)制、檢測(cè)技術(shù)及防控策略，為相關(guān)研究者提供全面參考。

一、病毒分類與生物學(xué)特性

（一）分類地位

RHDV2 隸屬于杯狀病毒科（Caliciviridae）兔病毒屬（Lagovirus），2023 年國(guó)際病毒分類委員會(huì)（ICTV）將其正式命名為歐洲兔病毒（Lagovirus europaeus）GI.2 基因型，與傳統(tǒng)兔出血癥病毒（RHDV/GI.1）同屬該物種的不同基因型。兔病毒屬包含兩個(gè)基因群：GI 群（兔源病毒）和 GII 群（野兔源病毒），其中 GI 群涵蓋致病性的 RHDV（GI.1）、RHDV2（GI.2）及非致病性的兔杯狀病毒（RCV），GII 群則包括歐洲野兔綜合征病毒（EBHSV）及非致病性野兔杯狀病毒（HaCV）?；蛐蛣澐忠?vp60 基因序列差

（二）病毒結(jié)構(gòu)與基因組特征

RHDV2 為單股正鏈 RNA 病毒，無(wú)囊膜，呈二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，病毒粒子直徑約 38-40nm。病毒基因組全長(zhǎng)約 7.4kb，包含兩個(gè)開(kāi)放閱讀框（ORF）：ORF1 編碼多聚蛋白，經(jīng)切割后形成非結(jié)構(gòu)蛋白（如 RNA 依賴的 RNA 聚合酶 RdRp、蛋白酶 3C 樣）和主要結(jié)構(gòu)蛋白 VP60；ORF2 編碼次要結(jié)構(gòu)蛋白 VP10，參與病毒粒子的穩(wěn)定性維持。VP60 蛋白是病毒的主要抗原，其 P2 亞域的 L1 環(huán)包含中和抗體表位，不同基因型間該區(qū)域的變異導(dǎo)致交叉保護(hù)有限，為疫苗研發(fā)帶來(lái)挑戰(zhàn)。

（三）關(guān)鍵進(jìn)化特征

基因重組是 RHDV2 快速進(jìn)化的核心機(jī)制，重組熱點(diǎn)主要位于 RdRp 與 vp60 基因交界處，部分毒株還存在 p16-p23 基因邊界的二次重組，形成三重重組體。重組毒株命名規(guī)則為：非結(jié)構(gòu)基因供體基因型 +“P”（聚合酶）+ 結(jié)構(gòu)基因供體基因型，例如 GI.3P-GI.2 代表非結(jié)構(gòu)基因源自 GI.3 型非致病性 RCV、結(jié)構(gòu)基因源自 GI.2 型 RHDV2 的重組毒株。這種重組特性使 RHDV2 能夠快速適應(yīng)新宿主和環(huán)境，不斷擴(kuò)大宿主范圍并增強(qiáng)傳播能力。

二、全球流行現(xiàn)狀與傳播趨勢(shì)

（一）時(shí)間與空間分布

RHDV2 于 2010 年 4-5 月在法國(guó)西北部和中部首次確診，隨后迅速在歐洲蔓延，2011 年傳入西班牙、意大利，2013-2016 年相繼擴(kuò)散至德國(guó)、荷蘭、瑞士、英國(guó)等國(guó)家。2015 年起，病毒開(kāi)始向其他大洲傳播：非洲（突尼斯、貝寧）、大洋洲（澳大利亞、新西蘭）、亞洲（以色列、日本、中國(guó)、新加坡）及美洲（加拿大、美國(guó)、墨西哥、古巴）均先后報(bào)告疫情。截至 2023 年 10 月，除南極洲外，全球六大洲均有 RHDV2 檢出記錄，其中 2020-2023 年為暴發(fā)高峰，中國(guó)、南非、夏威夷等此前未受影響的地區(qū)均首次報(bào)告病例。

（二）傳播途徑與驅(qū)動(dòng)因素

RHDV2 的全球傳播主要由人類活動(dòng)驅(qū)動(dòng)，包括合法或非法的家兔及兔產(chǎn)品貿(mào)易、種兔精液進(jìn)口、寵物兔跨區(qū)域運(yùn)輸?shù)?。例如，中?guó) 2020 年暴發(fā)的疫情被證實(shí)與從歐洲進(jìn)口的種兔或精液相關(guān)；新加坡 2020 年的疫情毒株與澳大利亞 2017 年流行株同源性高達(dá) 99.2%，推測(cè)通過(guò)境外輸入傳入。此外，病毒具有極強(qiáng)的環(huán)境抵抗力（與傳統(tǒng) RHDV 相當(dāng)），可通過(guò)污染物、媒介動(dòng)物（如嚙齒類、食肉類動(dòng)物）間接傳播，進(jìn)一步促進(jìn)了其擴(kuò)散。

（三）流行特點(diǎn)

1、取代傳統(tǒng)毒株：在歐洲、大洋洲等傳統(tǒng) RHDV 流行區(qū)域，RHDV2 憑借更廣泛的宿主范圍和更強(qiáng)的適應(yīng)性，在出現(xiàn)后 2 年內(nèi)迅速取代 GI.1 型毒株成為優(yōu)勢(shì)流行株，僅德國(guó)、波蘭等少數(shù)國(guó)家仍存在兩型病毒共循環(huán)。

2、持續(xù)暴發(fā)態(tài)勢(shì)：美國(guó)、墨西哥自 2020 年起出現(xiàn)大規(guī)模暴發(fā)，病毒已在北美西南部定殖，成為地方性流行；澳大利亞野兔種群受 RHDV2 影響，2014-2018 年種群數(shù)量下降達(dá) 60%，且至今仍保持高流行態(tài)勢(shì)。

3、地理擴(kuò)張加速：2022-2023 年，南非、克羅地亞等新區(qū)域相繼報(bào)告疫情，顯示病毒仍在持續(xù)擴(kuò)張地理分布范圍。

三、宿主范圍與致病特征

（一）宿主多樣性

RHDV2 的顯著特征是宿主范圍極廣，遠(yuǎn)超傳統(tǒng) RHDV（僅感染歐洲兔）：

1、兔屬（Oryctolagus）：家兔和野生歐洲兔是主要宿主，也是病毒傳播的核心傳染源，自然感染死亡率為 10%-90%，小型易感家兔群體死亡率可達(dá) 100%。

2、野兔屬（Lepus）：包括歐洲棕兔、伊比利亞野兔、黑尾長(zhǎng)耳大野兔、羚羊長(zhǎng)耳大野兔等，感染后多表現(xiàn)為散發(fā)性發(fā)病，死亡率低于歐洲兔，但部分毒株可引發(fā)野兔種群暴發(fā)。

3、棉尾兔屬（Sylvilagus）：沙漠棉尾兔、東部棉尾兔、西部灌叢兔等北美本土棉尾兔物種均易感，2020 年美國(guó)西南部暴發(fā)中，該屬動(dòng)物為主要受感染的野生宿主。

4、其他兔科動(dòng)物：侏儒兔（Brachylagus idahoensis）、紅巖兔（Pronolagus spp.）等瀕危或特有物種也已報(bào)告感染，對(duì)物種保護(hù)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。

5、非兔形目動(dòng)物：西班牙的地中海田鼠、白齒鼩，葡萄牙的歐亞獾，澳大利亞的袋獾、赤狐等動(dòng)物體內(nèi)已檢出 RHDV2 RNA，部分還證實(shí)病毒具有感染性，提示這些動(dòng)物可能作為病毒儲(chǔ)存宿主或傳播媒介。

（二）臨床癥狀與病理變化

1、臨床特征：潛伏期通常為 1-3 天，較傳統(tǒng) RHDV 略長(zhǎng)。急性病例表現(xiàn)為突然死亡，死前可能出現(xiàn)發(fā)熱（40℃以上）、精神沉郁、食欲廢絕、口鼻出血、黃疸等癥狀；亞急性和慢性病例占比高于傳統(tǒng) RHDV，表現(xiàn)為漸進(jìn)性消瘦、肝功能損傷，部分可康復(fù)并產(chǎn)生抗體。幼兔（<2 周齡）對(duì) RHDV2 易感，而傳統(tǒng) RHDV 通常不感染幼兔，這也是 RHDV2 的重要鑒別特征。

2、病理變化：

宏觀病變：肝臟腫大、蒼白，表面呈小葉狀或網(wǎng)狀紋理，切面易碎；肺臟充血、出血，氣管黏膜暗紅；脾臟腫大、質(zhì)脆；多個(gè)器官可見(jiàn)彌散性出血，腹腔內(nèi)常積聚血性液體。部分病例病變不典型，需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診。

微觀病變：肝細(xì)胞壞死（門(mén)脈周圍或彌漫性）是特征性病變，表現(xiàn)為肝細(xì)胞溶解、嗜酸性變、核碎裂；肺臟、腎臟、脾臟等器官可見(jiàn)微血管血栓形成；脾臟紅髓玻璃樣壞死、白髓淋巴細(xì)胞減少。

（三）致病機(jī)制

RHDV2 主要通過(guò)損傷肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞和擾亂凝血功能致?。翰《窘?jīng)消化道或呼吸道侵入后，在肝細(xì)胞內(nèi)大量復(fù)制，導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死和肝功能衰竭；同時(shí)病毒感染引發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血，導(dǎo)致多器官出血和休克，最終導(dǎo)致動(dòng)物死亡。不同宿主的致病性差異可能與病毒受體分布、免疫系統(tǒng)反應(yīng)及病毒基因型差異相關(guān)。

四、診斷技術(shù)進(jìn)展

（一）病毒核酸檢測(cè)

1、RT-PCR/RT-qPCR：針對(duì) vp60 基因的 RT-qPCR 是目前最常用的確診方法，具有高靈敏度和特異性，可用于肝臟、血液、直腸拭子等樣本檢測(cè)。 duplex RT-qPCR 可同時(shí)區(qū)分 RHDV 和 RHDV2，適用于流行病學(xué)監(jiān)測(cè)；基于干血濾紙片和耳組織樣本的 RT-qPCR 檢測(cè)，為野生兔科動(dòng)物的現(xiàn)場(chǎng)采樣和監(jiān)測(cè)提供了便利。

2、測(cè)序技術(shù)：vp60 基因部分測(cè)序可用于基因型鑒定，全基因組測(cè)序（WGS）則用于重組事件分析和分子流行病學(xué)溯源，是追蹤病毒傳播路徑的核心技術(shù)。

（二）抗原檢測(cè)

1、血凝試驗(yàn)（HA）：RHDV2 可凝集人 O 型紅細(xì)胞，可用于初步篩查，但無(wú)法區(qū)分不同兔病毒屬毒株。

2、ELISA：夾心 ELISA 可檢測(cè)肝臟勻漿中的 RHDV2 抗原，適用于無(wú) PCR 設(shè)備的基層實(shí)驗(yàn)室；免疫層析試紙條可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，適合養(yǎng)殖場(chǎng)和野外調(diào)查。

3、免疫組化（IHC）：泛兔病毒屬抗體 IHC 可檢測(cè)組織中的病毒抗原，用于病理切片的病原定位，輔助確診。

（三）血清學(xué)檢測(cè)

競(jìng)爭(zhēng) ELISA 是檢測(cè) RHDV2 抗體的常用方法，可用于免疫效果評(píng)估和流行病學(xué)調(diào)查；中和試驗(yàn)可檢測(cè)特異性中和抗體滴度，但操作繁瑣，主要用于科研和疫苗效力評(píng)價(jià)。需注意的是，由于不同基因型間交叉反應(yīng)有限，血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合病毒基因型進(jìn)行解讀。

（四）新型檢測(cè)技術(shù)

原位雜交（RNAscope）可精準(zhǔn)定位組織中的病毒核酸，適用于病理機(jī)制研究；基于肝臟類器官的病毒分離培養(yǎng)技術(shù)，解決了傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)難以分離兔病毒屬病毒的難題，為病毒分離和特性研究提供了新工具。

五、防控策略與挑戰(zhàn)

（一）疫苗防控

疫苗接種是預(yù)防 RHDV2 的關(guān)鍵手段，但由于病毒基因型多樣且存在重組現(xiàn)象，傳統(tǒng) RHDV 疫苗對(duì) RHDV2 的保護(hù)效果有限，需研發(fā)針對(duì)性疫苗。目前已上市的 RHDV2 疫苗，其免疫保護(hù)期可達(dá) 6 個(gè)月以上，但需注意以下問(wèn)題：

1、交叉保護(hù)不足：針對(duì) GI.2a 變異株的疫苗對(duì)其他變異株的保護(hù)效果可能下降，需根據(jù)流行毒株更新疫苗毒株。

2、免疫時(shí)機(jī)：幼兔應(yīng)在 3-4 周齡首次免疫，間隔 3 周加強(qiáng)免疫，成年兔每年免疫 1-2 次；免疫后 15 天內(nèi)避免接觸病毒，以免影響免疫效果。

3、野兔免疫：對(duì)于瀕危野生兔科動(dòng)物，可通過(guò)口服疫苗或誘餌疫苗進(jìn)行群體免疫，但實(shí)施難度較大。

（二）生物安全措施

1、養(yǎng)殖場(chǎng)防控：嚴(yán)禁從疫區(qū)引進(jìn)種兔和兔產(chǎn)品，引進(jìn)動(dòng)物需隔離檢疫至少 14 天；定期對(duì)兔舍、設(shè)備和環(huán)境進(jìn)行消毒（可用含氯消毒劑、過(guò)氧乙酸等）；避免野兔與家兔接觸，防止交叉感染。

2、寵物兔防控：寵物兔應(yīng)定期接種疫苗，避免帶兔到疫區(qū)旅行；接觸兔只前后需洗手，寵物兔用品不與其他兔只共用。

3、野生兔監(jiān)測(cè)：建立野生兔科動(dòng)物 RHDV2 監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情，采取隔離、消毒等措施，防止疫情擴(kuò)散至養(yǎng)殖場(chǎng)。

（三）面臨的挑戰(zhàn)

1、病毒變異與重組：RHDV2 的高重組率導(dǎo)致新毒株不斷出現(xiàn)，可能突破現(xiàn)有疫苗的免疫保護(hù)，需持續(xù)開(kāi)展流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和疫苗更新。

2、野生宿主防控困難：野生兔科動(dòng)物分布廣泛、流動(dòng)性強(qiáng)，難以實(shí)施全面免疫，成為病毒的天然儲(chǔ)存庫(kù)，給疫情防控帶來(lái)極大挑戰(zhàn)。

3、診斷技術(shù)普及不足：基層養(yǎng)殖場(chǎng)和偏遠(yuǎn)地區(qū)缺乏先進(jìn)的檢測(cè)設(shè)備，容易導(dǎo)致誤診和漏診，延誤防控時(shí)機(jī)。

4、跨境傳播風(fēng)險(xiǎn)：全球化貿(mào)易和寵物運(yùn)輸?shù)脑黾?，使病毒跨境傳播的概率顯著上升，需加強(qiáng)國(guó)際合作與檢疫監(jiān)管。

六、研究展望

RHDV2 作為一種快速進(jìn)化、宿主廣泛的新興病毒，已成為全球兔科動(dòng)物健康和養(yǎng)兔業(yè)發(fā)展的重大威脅。過(guò)去十余年的研究的雖然在病毒生物學(xué)、診斷技術(shù)和疫苗研發(fā)等方面取得了顯著進(jìn)展，但病毒變異、野生宿主防控等問(wèn)題仍亟待解決。相關(guān)科研人員需持續(xù)開(kāi)展病毒監(jiān)測(cè)，深入解析 RHDV2 的重組規(guī)律和變異趨勢(shì)，建立病毒進(jìn)化預(yù)警模型，為疫苗毒株選擇提供科學(xué)依據(jù)；技術(shù)創(chuàng)新和防控實(shí)踐，

明確病毒受體、宿主免疫應(yīng)答與致病性的關(guān)系，揭示不同宿主的易感性差異機(jī)制，為新型防控技術(shù)研發(fā)提供靶點(diǎn)。開(kāi)發(fā)多價(jià)疫苗、基因工程疫苗（如 VP60 亞單位疫苗、載體疫苗）和口服疫苗，提高疫苗的交叉保護(hù)力和使用便利性。研發(fā)快速、靈敏、低成本的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)技術(shù)，如膠體金試紙條、等溫?cái)U(kuò)增試劑盒等，滿足基層防控需求。共同構(gòu)建 RHDV2 的綜合防控體系，保障養(yǎng)兔業(yè)可持續(xù)發(fā)展和兔科動(dòng)物多樣性。